膠體金快速檢測(cè)卡操作過程中的常見問題
膠體金檢測(cè)卡又被稱為膠體金檢測(cè)試紙,是一種不需要專業(yè)技能和昂貴復(fù)雜的儀器設(shè)備即可實(shí)現(xiàn)對(duì)抗原、抗體和半抗原等各種分析物的定量和半定量檢測(cè)的快速檢測(cè)產(chǎn)品。
膠體金卡的組成:
膠體金檢測(cè)卡由樣品墊、結(jié)合墊、層析膜,吸水紙和塑料卡殼五個(gè)單元組成。樣品墊為經(jīng)過處理的纖維膜或者玻璃棉,作用是快速吸收待檢樣品溶液,使其通過虹吸作用向結(jié)合墊側(cè)向流動(dòng)。結(jié)合墊同樣是纖維膜或者玻璃棉,主要用于吸附有標(biāo)記的生物活性材料(如金標(biāo)抗體),它可與待測(cè)樣品溶液中的檢測(cè)靶標(biāo)結(jié)合形成肉樣可見的免疫復(fù)合物。層析膜為纖維膜或者尼龍膜,連接在結(jié)合墊和吸水墊之間,其上固定有兩條或者多條不同活性材料,形成“檢測(cè)線T線“和”控制線C線“印跡,主要用于與攔截帶標(biāo)記的免疫復(fù)合物,顯示檢測(cè)結(jié)果。塑料卡殼是適用于將這些組件包裝起來的外殼,方便檢測(cè)同時(shí)具有固定卡條。
膠體金檢測(cè)卡的反應(yīng)原理:
檢測(cè)卡是基于膜免疫層析原理建立起來的快速檢測(cè)產(chǎn)品。當(dāng)將制備好的待測(cè)樣品溶液滴加到檢測(cè)卡滴液孔(s孔),樣品溶液在虹吸作用下由測(cè)試端向手柄端側(cè)向流動(dòng),待測(cè)靶標(biāo)在側(cè)向流動(dòng)過程中會(huì)與結(jié)合墊上的生物活性物質(zhì)(抗體、抗原或者生物大分子)先發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng),形成復(fù)合物,在側(cè)向流動(dòng)中在與檢測(cè)線和質(zhì)控線上的生物活性物質(zhì)發(fā)生結(jié)合反應(yīng)固定起來,形成肉眼可見的檢測(cè)線和質(zhì)控線,進(jìn)而根據(jù)檢測(cè)線和質(zhì)控線的顯色情況判斷結(jié)果。
下面我們介紹下膠體金快速檢測(cè)卡操作過程中的常見問題
常見問題/異常情況 |
原因分析 |
建議處理方案 |
樣品層析速度異常慢無樣本跑動(dòng)(在檢測(cè)窗內(nèi)不見有液體在膜上流動(dòng)) |
|
|
檢測(cè)窗內(nèi)出現(xiàn)紅/紫色堅(jiān)線 |
該試紙條受輕微的物理損傷 |
該情況不影響檢測(cè)結(jié)果,可在背景清晰后于規(guī)定時(shí)間內(nèi)讀取結(jié)果,或更換新測(cè)試條重新檢測(cè) |
有大量全血溢出,NC膜表面偏紅,影響結(jié)果判讀 |
|
|
層析時(shí)無紅/紫紅色背景出現(xiàn) |
該測(cè)試條已受潮失效 |
更換新測(cè)試條重新檢測(cè) |
漏檢率偏高(假陰性) |
|
|
檢測(cè)線/對(duì)照線不完整 |
該試劑條有輕微的物理損傷 |
該情況不影響檢測(cè)結(jié)果,也可更換新測(cè)試條重新檢測(cè) |
檢測(cè)線與對(duì)照線之間出現(xiàn)灰暗的陰影 |
測(cè)試條NC膜表面的透明膠帶邊沿引起的視覺差異 |
該情況不影響檢測(cè)結(jié)果,可在規(guī)定時(shí)間內(nèi)讀取結(jié)果 |
檢測(cè)后出現(xiàn)假陽性結(jié)果 |
|
|
呈色檢測(cè)線比對(duì)照線明顯深黑 |
強(qiáng)陽性結(jié)果 |
正常情況,不影響檢測(cè)結(jié)果 |
檢測(cè)線或?qū)φ障囵^線附近出現(xiàn)白斑或白色條帶 |
個(gè)別情況,NC膜自身質(zhì)量原因,生產(chǎn)無法控制 |
該情況一般不影響檢測(cè)結(jié)果 |
同一樣本血清檢出時(shí)間快于全血標(biāo)本 |
相同體積的血清標(biāo)本含受檢物的量要高于全血標(biāo)本 |
正常情況,不影響檢測(cè)結(jié)果 |
NC膜表面顏色較深(紫紅甚至偏紫) |
測(cè)試剛開始該現(xiàn)象明顯,3-5分鐘后顏色就會(huì)明顯褪去屬正常現(xiàn)象 |
正常情況,不影響檢測(cè)結(jié)果 |