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膠體金快速檢測(cè)卡操作過程中的常見問題

作者: vch12690211
發(fā)布于: 2023-08-22 10:59
閱讀: 208

膠體金檢測(cè)卡又被稱為膠體金檢測(cè)試紙,是一種不需要專業(yè)技能和昂貴復(fù)雜的儀器設(shè)備即可實(shí)現(xiàn)對(duì)抗原、抗體和半抗原等各種分析物的定量和半定量檢測(cè)的快速檢測(cè)產(chǎn)品。

膠體金卡的組成:

膠體金檢測(cè)卡由樣品墊、結(jié)合墊、層析膜,吸水紙和塑料卡殼五個(gè)單元組成。樣品墊為經(jīng)過處理的纖維膜或者玻璃棉,作用是快速吸收待檢樣品溶液,使其通過虹吸作用向結(jié)合墊側(cè)向流動(dòng)。結(jié)合墊同樣是纖維膜或者玻璃棉,主要用于吸附有標(biāo)記的生物活性材料(如金標(biāo)抗體),它可與待測(cè)樣品溶液中的檢測(cè)靶標(biāo)結(jié)合形成肉樣可見的免疫復(fù)合物。層析膜為纖維膜或者尼龍膜,連接在結(jié)合墊和吸水墊之間,其上固定有兩條或者多條不同活性材料,形成“檢測(cè)線T線“和”控制線C線“印跡,主要用于與攔截帶標(biāo)記的免疫復(fù)合物,顯示檢測(cè)結(jié)果。塑料卡殼是適用于將這些組件包裝起來的外殼,方便檢測(cè)同時(shí)具有固定卡條。

膠體金檢測(cè)卡的反應(yīng)原理:

檢測(cè)卡是基于膜免疫層析原理建立起來的快速檢測(cè)產(chǎn)品。當(dāng)將制備好的待測(cè)樣品溶液滴加到檢測(cè)卡滴液孔(s孔),樣品溶液在虹吸作用下由測(cè)試端向手柄端側(cè)向流動(dòng),待測(cè)靶標(biāo)在側(cè)向流動(dòng)過程中會(huì)與結(jié)合墊上的生物活性物質(zhì)(抗體、抗原或者生物大分子)先發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng),形成復(fù)合物,在側(cè)向流動(dòng)中在與檢測(cè)線和質(zhì)控線上的生物活性物質(zhì)發(fā)生結(jié)合反應(yīng)固定起來,形成肉眼可見的檢測(cè)線和質(zhì)控線,進(jìn)而根據(jù)檢測(cè)線和質(zhì)控線的顯色情況判斷結(jié)果。 

下面我們介紹下膠體金快速檢測(cè)卡操作過程中的常見問題

常見問題/異常情況

原因分析

建議處理方案

樣品層析速度異常慢無樣本跑動(dòng)(在檢測(cè)窗內(nèi)不見有液體在膜上流動(dòng))

  1. 加樣量太少(一般要求加樣為40-80ul)。
  2. 樣本過于粘稠或有沉淀物(如血塊)。
  3. 該測(cè)試條已受潮失效。
  1. 增加加液量或滴加少量輔助液
  2. 滴加少理輔助液,對(duì)樣本進(jìn)行預(yù)處理以去除沉淀物(血清/血漿離心后使用,全血重新取樣)
  3. 更換新測(cè)試條重新檢測(cè),測(cè)試條盡量現(xiàn)拆現(xiàn)用

檢測(cè)窗內(nèi)出現(xiàn)紅/紫色堅(jiān)線

該試紙條受輕微的物理損傷

該情況不影響檢測(cè)結(jié)果,可在背景清晰后于規(guī)定時(shí)間內(nèi)讀取結(jié)果,或更換新測(cè)試條重新檢測(cè)

有大量全血溢出,NC膜表面偏紅,影響結(jié)果判讀

  1. 該測(cè)試條NC膜嚴(yán)重受損(機(jī)械損傷)或斷裂
  2. 使用已溶血的全血標(biāo)本
  1. 更換新測(cè)試條重新檢測(cè)。
  2. 盡量使用新鮮全血進(jìn)行檢測(cè)

層析時(shí)無紅/紫紅色背景出現(xiàn)

該測(cè)試條已受潮失效

更換新測(cè)試條重新檢測(cè)

漏檢率偏高(假陰性)

  1. 檢測(cè)時(shí)間太短
  2. 加樣量太少,輔助液滴加過量,樣本被稀釋
  3. 樣本中被檢物濃度太低
  4. 個(gè)別樣本中含有較為特殊物質(zhì)或亞型
  5. 該測(cè)試條受潮,活性下降或失活
  1. 按說明書要求正確判讀(建議對(duì)于較弱陽性或陰性標(biāo)本至少10-15分鐘判讀結(jié)果
  2. 按說明書要求正確加樣或輔助液
  3. 采用其它檢測(cè)方法進(jìn)行確認(rèn)
  4. 更換新測(cè)試條重新檢測(cè),測(cè)試條盡量現(xiàn)拆現(xiàn)用

檢測(cè)線/對(duì)照線不完整

該試劑條有輕微的物理損傷

該情況不影響檢測(cè)結(jié)果,也可更換新測(cè)試條重新檢測(cè)

檢測(cè)線與對(duì)照線之間出現(xiàn)灰暗的陰影

測(cè)試條NC膜表面的透明膠帶邊沿引起的視覺差異

該情況不影響檢測(cè)結(jié)果,可在規(guī)定時(shí)間內(nèi)讀取結(jié)果

檢測(cè)后出現(xiàn)假陽性結(jié)果

  1. 該測(cè)試條靈敏度偏高
  2. 該樣本含特殊干擾物或已被污染
  3. 在規(guī)定的時(shí)間后判讀結(jié)果
  1. 提前判讀結(jié)果或更換新測(cè)試 條重新檢測(cè)
  2. 用其他檢測(cè)方法確診檢測(cè)結(jié)果,確保樣本不受污染
  3. 按說明書要求正確判讀結(jié)果,30分名鐘后檢測(cè)結(jié)果可能不準(zhǔn)確

呈色檢測(cè)線比對(duì)照線明顯深黑

強(qiáng)陽性結(jié)果

正常情況,不影響檢測(cè)結(jié)果

檢測(cè)線或?qū)φ障囵^線附近出現(xiàn)白斑或白色條帶

個(gè)別情況,NC膜自身質(zhì)量原因,生產(chǎn)無法控制

該情況一般不影響檢測(cè)結(jié)果

同一樣本血清檢出時(shí)間快于全血標(biāo)本

相同體積的血清標(biāo)本含受檢物的量要高于全血標(biāo)本

正常情況,不影響檢測(cè)結(jié)果

NC膜表面顏色較深(紫紅甚至偏紫)

測(cè)試剛開始該現(xiàn)象明顯,3-5分鐘后顏色就會(huì)明顯褪去屬正常現(xiàn)象

正常情況,不影響檢測(cè)結(jié)果

 

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