金剛烷胺膠體金免疫層析檢測卡快速檢測禽肉中金剛烷胺殘留
金剛烷胺(amantadine, AMD)是一種水溶性三環(huán)胺, 分子式為C10H17N, 結構式如圖1所示[1]。金剛烷胺通常為白色粉末或小顆粒狀, 無臭無味, 易溶于有機溶劑, 在光和空氣中性質穩(wěn)定, 常儲存在陰涼干燥的密閉容器中。
流感病毒的肆虐和金剛烷胺類藥物的廣泛使用, 導致近年來流感病毒耐藥株呈現(xiàn)增長的趨勢。另一方面, 金剛烷胺以原藥形式在生物體內部存在和蓄積, 在體內降解代謝量極少, 從而對人體健康產(chǎn)生不良影響。金剛烷胺的副作用主要與中樞神經(jīng)系統(tǒng)有關, 這些副作用包括幻覺、混亂和噩夢。這些癥狀在日劑量超過200 mg或與抗膽堿能藥物同時使用時尤為常見。過量用藥時, 將引起急性精神病、昏迷和心血管毒性等癥狀, 嚴重時會導致病人死亡。
國家市場監(jiān)督管理總局已公布的40項食品快速檢測方法中包括31項膠體金免疫層析法和1項熒光免疫層析法等。目前,膠體金免疫層析法是主流的快檢方法,可以檢測獸藥殘留(金剛烷胺和瘦肉精等)、農藥殘留(腐霉利和滅蠅胺等)、真菌毒素(黃曲霉毒素B1和嘔吐毒素等)、違禁物質(孔雀石綠和三聚氰胺等)。
深圳艾瑞斯生產(chǎn)的金剛烷胺膠體金免疫層析檢測卡用于快速檢測水產(chǎn)組織、飼料、禽蛋中的金剛烷胺殘留,整個檢測過程只需要5-10分鐘左右,本試紙條為定性檢測,檢測卡靈敏度為5ppb。
金剛烷胺膠體金免疫層析檢測卡組織樣本前處理
1.魚蝦蟹、畜禽肉、內臟等去皮,用均質器均質樣本,取2g去脂肪組織樣本,加入到配套的15ml離心管中。
2.向離心管中準確加入純凈水和提取劑(乙酸乙酯)各2mL,將瓶塞蓋緊密封,用力振蕩3分鐘,4000rpm離心3分鐘。
3.用吸管取分層后的上清液1mL到配套5ml離心管中,用氮吹或吹風機吹干(離心管管底有部分顆粒狀未吹干黃色油脂屬正常現(xiàn)象),向吹干的5ml離心管中加入0.3ml(配套滴管約10滴)配套稀釋液,充分復溶離心管底部及內壁固體殘留物,此溶解液即為待檢液。(備注:待檢液盡量在30分鐘內進行測試).
操作步驟
1、測試前先完整閱讀使用說明書,使用前將試劑板和待檢樣本溶液恢復至室溫(20℃-30℃)。
2、從鋁箔袋中取出檢測卡/金標微孔/滴管(共三樣耗材),水平放置于觀察者正面;
3、用鋁箔袋中配套滴管吸取上述前處理步驟中待檢液120微升(約4-5滴)于金標微孔中,用配套滴管輕柔吹打30秒,完全溶解金標微孔底部紅色物質,水平靜置,等待反應2分鐘,吸取金標微孔內紅色溶液,輕柔吹打10秒后,全部滴加到檢測卡加樣孔(S)中,加樣后開始計時。
4、結果應在5-8 分鐘讀取,30分鐘后結果判讀無效。