土霉素/金霉素/四環(huán)素殘留量如何檢測
四環(huán)素是一種有機化合物,分子式為C22H24N2O8,本身及其鹽類都是黃色或淡黃色的晶體,在干燥狀態(tài)下極為穩(wěn)定,除金霉素外,其他的四環(huán)素族的水溶液都相當穩(wěn)定。四環(huán)素族能溶于稀酸、稀堿等,略溶于水和低級醇,但不溶于醚及石油醚。四環(huán)素族抗生素主要包括有金霉素、土霉素、四環(huán)素。四環(huán)素族抗生素有共同的化學結(jié)構(gòu)母體。金霉素和土霉素都是四環(huán)素的衍生物,前者是氯四環(huán)素(chloretracyelin),后者是氧四環(huán)素(oxyeracyein),四環(huán)素族均為酸堿兩性化合物。
四環(huán)素的最高殘留限量是所有食品動物,肌肉100微克/千克,肝臟300微克/千克,腎臟600微克/千克;牛奶、羊奶100微克/升,禽蛋200微克/千克;魚肉、蝦肉100微克/千克。
深圳艾瑞斯生產(chǎn)的土霉素/金霉素/四環(huán)素膠體金快速檢測卡應用了競爭抑制免疫層析的原理,樣品中的四環(huán)素在流動的過程中與膠體金標記的特異性四環(huán)素單克隆抗體結(jié)合,抑制了抗體和NC膜檢測線上的四環(huán)素-BSA偶聯(lián)物的結(jié)合,從而導致檢測線顏色的深淺變化。當樣品中不含有四環(huán)素或濃度低于檢測限時,T線顯色強于C線顯色或與C線顯色一致。當樣品中的四環(huán)素濃度等于或高于檢測限時,T線顯色明顯弱于C線顯色或T線不顯色。而無論樣品中是否含有四環(huán)素質(zhì)控線C線都會顯色,以示檢測有效。
【樣品處理】
雞魚: 稱取3g±0.05g組織,加入稀釋后的3ml樣本提取液A,振蕩3min,再加入300ul樣本提取液B,振蕩3min,4000rpm離心10min,取上清待檢。
蝦: 稱取3g±0.05g組織,加入稀釋后的3ml樣本提取液A,振蕩3min,再加入240ul樣本提取液B,振蕩3min,4000rpm離心10min,取上清待檢。
【檢測步驟】
1.使用前請先仔細閱讀說明書。使用前將本試紙條和待檢樣品恢復至室溫。
2.取出試劑筒,打開后取出所需數(shù)目的微孔和試紙條,并做好標記。請在1h內(nèi)盡快使用。檢測試劑取出后,請立即蓋好試劑筒蓋子,防止受潮。
3.用微量移液器吸取200µl待檢樣品于微孔中,緩慢多次抽吸直至混合均勻,肉眼觀察無固形物(該步驟很重要)。
4.室溫(20-25℃)孵育5min后,將標記好的試紙條插入微孔中。
5.使試紙條浸在微孔中5min,根據(jù)示意圖判讀結(jié)果,其他時間判讀無效。
【結(jié)果判定】
1、陰性:T線顯色強于C線或與C線顯色無明顯差異,表示樣品中不含四環(huán)素或其濃度低于檢測限。
2、陽性:T線顯色明顯弱于C線顯色,或者T線不顯色,表示樣品中四環(huán)素濃度等于或高于檢測限。
3、無效:C線與T線均無紅色條帶出現(xiàn)或者C線無紅色條帶出現(xiàn)但T線有紅色條帶出現(xiàn);說明此試劑卡已失效、過期,或操作不當,需另做一次測試。