呋喃西林代謝物快速檢測卡(魚蝦、水產品)
呋喃西林屬于硝基呋喃類抗菌藥物,可用于預防和治療細菌感染引起的腸道感染疾病,因其價格低、效果好、不易產生抗藥性,曾經被廣泛應用于禽類、畜類和水產類動物的養殖中。呋喃西林藥物代謝快速,在生物體內消除時間短,然后其代謝物(氨基脲)會在生物體內與細胞膜蛋白結合形成穩定的結合態,且會長期存在。
呋喃西林、呋喃唑酮及其代謝物等具有致突變作用,雖然有關呋喃咜酮、呋喃妥因及其代謝物等的毒性數據尚不充分,但出于安全性考慮,歐盟于1995年禁止食用動物中使用硝基呋喃類抗生素。2002年我國農業部公告的“獸藥及其它化合物清單”中明確硝基呋喃類藥物禁止在所有食品動物中使用;2019年農業農村部修定的“食品動物中禁止使用的藥品及其他化合物清單”(農業農村部公告 第250號)中依舊將硝基呋喃類藥物作為禁用藥品。
深圳艾瑞斯生產的呋喃西林代謝物快速檢測卡應用競爭抑制膠體金免疫層析的原理制成,用于檢測組織樣本中呋喃西林代謝物殘留。整個檢測過程需要2個小時,適用于各類企業及檢測機構。
樣本前處理
1、取切碎的一定量的去脂肪水產品組織樣品,用均質機均質;
2、稱取約5 g 均質物于50 mL 離心管中;
3、依次加入5 mL純凈水,0.5 ml 2.5M提取劑1,0.2 mL樣本衍生化試劑,充分振蕩混勻3 min;
4、置于60℃水域條件下孵育1小時;
5、取出后加入5 mL 0.1M磷酸氫二鉀,0.4 mL 2.5M氫氧化鈉,6 mL乙酸乙酯,充分混合3 min,室溫下(20-25℃) 4000 轉/分鐘 離心5 分鐘;
6、用移液器移取 3 mL 上層溶液于5 mL離心管中,65℃下氮(空)氣吹干,得固體殘渣;
7向吹干的離心管中先加入0.5 mL正己烷,加蓋振蕩混合1 min;再加入0.3 mL專用復溶液,充分混勻,4000 r/min離心1 min;
8取下層液體備用。
樣品檢測
1、從原包裝袋中取出試劑板,水平放置于觀察者正面;
2、吸取下層液體120μL于金標微孔中,吹打混勻(至少吹打10次),直至金標微孔內紅色物質完全溶解,等待5鐘,吸取全部液體滴加到檢測卡的加樣孔中;
3、 加樣后開始計時,室溫下放置8-10分鐘判斷結果,超過10分鐘的結果只能作為參考。 7
結果判斷
陰性:對照線(C)出現紫紅色線,檢測線(T)顯色比C線深或一樣深,表示樣品中呋喃西林代謝物濃度低于檢測限或不含呋喃西林代謝物。
陽性:對照線(C)出現紫紅色線,檢測線(T)不顯色或顯色比C線明顯淺,表示樣品中呋喃西林代謝物濃度高于檢測限。
失效:在檢測窗內,對照線(C)不出現紫紅色線。
注意事項
1、 過期或鋁箔袋破損的產品,均不可使用。
2 、檢測卡從冰箱中取出時應恢復到室溫后打開,打開的檢測卡應盡快使用以免受潮后失效。
3 、不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。
4 、取液滴管不可混用,以免交叉污染。
5 、待檢樣品溶液需清亮、無混濁顆粒、無細菌污染,否則容易導致阻塞、顯色不明顯等異常現象,從而影響實驗結果的判定。